《施洗者圣约翰》完成于1513年-1516年间，研究者普遍认为，这是达·芬奇的最后一幅画作，也是其最有名的画作之一。
达·芬奇《施洗者圣约翰》
（Saint John the Baptist）
布面油画 69 × 57cm 1513-1516年
巴黎卢浮宫
《施洗者圣约翰》完成于1513年-1516年间，达·芬奇于1519年去世，研究者普遍认为，这是达·芬奇的最后一幅画作，也是其最有名的画作之一。
《施洗者圣约翰》取材于《圣经》中的人物，在书中，布道者约翰是耶稣的表兄，他奉上帝之命，将为耶稣施以洗礼，当他舀起约旦河的圣水为耶稣洗礼时，天空突然豁然开朗，有一鸽子形状的圣灵显现在被启开的天空中，从此约翰紧随耶稣布道，得名“施洗者圣约翰”。
《施洗者圣约翰》局部
在《施洗者圣约翰》画面上，在漆黑的背景中，衬托出施洗者约翰裸露的上身，但身体其他部分没入黑暗之中，只有右肩到胳臂、脸部、右手以及隐约可见的左手，肩上搭着豹头，画中人物留着达芬奇擅长描绘的长长的卷发。
施洗者圣约翰宛如一个青年牧羊人，拥有雌雄莫辨的美，脸上露出妖冶而神秘的微笑。在画作中，达·芬奇使用了晕染效果，使得画面不仅轮廓柔和，线条朦胧，而且亮部与暗部之间的过渡也非常细腻。
在《圣经》中，施洗者圣约翰右手有力地指向天空，做出祈福的姿态，坚信耶稣的降临。左手轻托十字架，预示耶稣的到来和约翰先知的角色。
《施洗者圣约翰》中的手势
《施洗者圣约翰》虽属传统题材，人物和背景的描绘方式却是前所未见的。施洗者圣约翰手指向天，既是领受神的旨意，又是指向他身上光的来源，从而履行他在《圣经》中“为光作见证”的职责。达·芬奇用明暗法将浓重的阴影与醒目的光亮进行了对比，增强了画面的神秘感。
有研究者认为，圣约翰的手势代表了“永恒的问号，造物主之谜 ”。
也有研究者认为，施洗者约翰在茫茫黑暗之中指向天国，是画家达·芬奇当时内心苦闷与彷徨的写照。
另一件被认为是达·芬奇完成底稿的作品是《巴库斯》（Bacchus），但其后为达·芬奇的学徒或追随者完成画面。据X射线分析，画作最初描绘的主人公是施洗者约翰，但在1683至1693年间被涂掉，描绘成了酒神巴库斯，与现藏于卢浮宫的《施洗者圣约翰》相似。
或为达·芬奇的追随者《巴库斯》（Bacchus）
木板油画 177 × 115cm 约1515年
巴黎卢浮宫
也有研究者表示，《施洗者圣约翰》男女莫辨的圣约翰的原型，可能是达·芬奇的助手兼男仆沙莱。
不管何种解读，都会引发争议，数百年来，画中人物神秘的手势，被认为是达芬奇作品中最难解读的一个手势！
《圣母子、圣安娜与施洗者圣约翰》中出现相同的手势
《岩间圣母》中耶稣类似的手势
《圣母子与圣婴》中相同的手势
《岩间圣母》（卢浮宫版）中的人物手势
画作看点
研究者普遍认为这是达·芬奇的最后一幅画作；
人物神秘的手势，被认为是最难解读的手势；
画中人雌雄莫辨，露出妖冶而神秘的微笑，
被视为与《蒙娜丽莎》一样费解的“神秘微笑”；
画作对光线、明暗的处理，是典型的达芬奇式。
《施洗者圣约翰》局部